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一声声的呐喊或老或少有男有女形形色色的天庭成员从仙墓中钻出参加战场色谱分析原理看完这篇就明白了2020-11-10 00:20·BioArt植物来源 | 实验与分析色谱法是实验室非常重要又常用的分析方法由于色谱分析可以连续对样品进行浓缩、分离、提纯及测定使其成为每一个分析工作者普遍采用的分析、检测手段并已广泛应用于各个行业中可以说只要有分析任务的地方都在使用色谱分析法今天咱们补充基础知识哦色谱法的创始人是俄国的植物学家茨维特（ M.Tswett）1906年俄国植物学家茨维特发表了他的实验结果：为了分离植物色素他将含有植物色素的石油醚提取液倒入装有碳酸钙粉末的玻璃管中并用石油醚自上而下淋洗由于不同的色素在碳酸钙颗粒表面的吸附力不同随着淋洗的进行不同色素向下移动的速度不同从而形成一圈圈不同颜色的色带使各色素成分得到了分离他将这种分离方法命名为色谱法(chromatography)伟大的茨维特植物叶色素的分离实验☞ 茨维特实验图示√ 色谱柱—玻璃柱√ 固定相—CaCO3颗粒√ 流动相—石油醚随着分离手段的不断发展越来越多的无色物质成为被分离的对象色谱也渐渐失去了色的含义但这个名称却沿用至今色谱分析法（Chromatography）简称色谱法或层析法是一种物理或物理化学分离分析方法该法利用某一特定的色谱系统（薄层色谱、高效液相色谱或气相色谱等系统）进行混合物中各组分的分离分析主要用于分析多组分样品▪ 固定相：在色谱分离中固定不动对样品产生保留的一相▪ 流动相：带动样品向前移动的另一相分类1、按两相物理状态分类▪ 流动相：气相色谱、液相色谱、超临界流体色谱▪ 固定相：气－固、气－液；液－固、液－液2、按固定相的形式分类▪ 柱色谱：填充柱色谱、毛细管柱色谱、微填充柱色谱、制备色谱▪ 平面色谱：纸色谱、薄层色谱、高分子膜色谱3、按分离机制分类▪ 吸附色谱：根据不同组分在吸附剂上的吸附和解吸能力的大小而分离▪ 分配色谱：根据不同组分在固定液中溶解度的大小而分离▪ 分子排阻色谱：依据分子体积大小不同进行分离ln离子交换色谱：不同组分对离子交换树脂的亲和力不同而分离▪ 亲和色谱：利用生物大分子之间的存在的专一的特殊亲和力进行分离▪ 毛细管电泳：依据各组分淌度和（或）分配行为的差异进行分离▪ 手性色谱：用于手性药物的分离分析可分为三类：手性衍生化试剂法；手性流动相添加剂法；手性固定相拆分法基本术语1、色谱法的基本术语检测色谱分离后组分的响应信号对时间作图得到的曲线称为色谱图色谱流出曲线▪ 基线：在一定色谱条件下仅有流动相通过检测器系统时所产生的信号的曲线称为基线如图中ot线实验条件稳定时基线是一条平行于横轴的线；基线反映仪器（主要是检测器）的噪声随时间的变化▪ 峰高：色谱峰顶点与基线之间的垂直距离以h表示如图AB’线▪ 区域宽度：色谱峰的区域宽度直接与分离效率有关描述色谱峰宽的方法有三种：标准偏差σ、峰宽W、半峰宽W1/2▪ 标准偏差（σ）：σ为正态分布曲线上两拐点间距离之半σ值的大小表示组分离开色谱柱的分散程度σ值越大流出的组分越分散分离效果变差；反之流出组分集中分离效果好▪ 峰宽W：通过色谱峰两侧的拐点作切线在基线上的截距称为峰宽或称基线宽度也可用W表示如图IJ 的距离根据正态分布的原理 可证得峰宽和标准差的关系是W=4σ▪ 半峰宽W1/2：峰高一半处的峰宽称为半峰宽如图 GH 的距离W1/2=2.355σW=1.699W1/2W1/2、W都是由σ派生而来的除用它们衡量柱效外还用于计算峰面积半峰宽测量较方便最为常用2、色谱保留值、相对保留值与保留指数▪ 保留值是用来描述样品组分在色谱柱中保留程度的参数并作为色谱定性的指标其表示方法有：▪ 相对保留值又称分离因子、分配系数比或相对容量因子即在一定色谱条件下被测组分的调整保留时间（体积）与标准物的调整保留时间（体积）之比采用相对保留值是为了消除某些操作条件如流速和固定液流失等对保留值的影响相对保留值中标准物可以是被测样品中的某一组分也可以是人为加入的某一化合物▪ 保留指数I为待测物质i在某固定液X上的保留指数选取两个正构烷烃作为基准物质其中一个的碳数为N另一个为N+n它们的调整保留时间分别为t’R(N)和 t’R(N+n)使待测物质i的调整保留时间t’R(i)恰好于两者之间即t’R(N)